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1. 再试一次反应,你可能遗漏了一些东西。
2. 检查聚合酶缓冲液是否已完全解冻并充分混合。
3. 检查引物是否稀释到正确的浓度。
4. 配制新的 dNTP 溶液。dNTPs 可以被反复冻融破坏。
5. 重新制作模板 DNA,尤其是在处理基因组 DNA 时。旧库存可能会退化或被剪掉。
6. 使用不同的聚合酶。如果使用校对聚合酶进行扩增有问题,我经常尝试使用良好的旧 Taq,这通常可以解决问题。不过请记住对插入片段进行排序——如果幸运的话,不会有任何重大突变,您可以按原样使用插入片段。否则,使用 Taq 和 1/10 浓度的校对酶的混合物重新进行 仪器,您仍应获得相同的扩增,但错误率较低。
7. 改变退火温度。如果退火温度太高,您显然不会按照您想要的顺序进行任何启动。另一方面,太低的退火温度会导致这种非特异性引发,不允许出现特定条带。找到温度的方法是使用梯度循环仪并以 1oC 的增量测试从引物 Tm 到低于 10oC 的范围。
8. 尝试不同模板浓度的反应。您的模板浓度可能太低或制备中的杂质浓度可能太高。在 50 微升反应中尝试 5-10 次平行反应,浓度为 10 到 200 ng。
9. 检查 仪器 仪——温度和时间是否符合您的预期?
10. 在另一台循环仪中尝试反应——您使用的循环仪的校准可能已关闭。
11.尝试添加剂。我发现 DMSO 在有问题的扩增中特别有用。
12.重新设计引物——尽量遵守指南。
计算机系统和工作站,在BGA封装的所有优势中,重要的一个在于其在焊球阵列分布中的应用。保证BGA焊接的共面性,因为焊料熔化后会自动补偿芯片和无线电综合测试仪之间的面度误差,由于焊点较小,自感和互感系数低,因此具有出色的电气特性和频率特性,能够自动进行自动对准和焊点之间的张力。除极端温度外,湿度也是关键考虑因素,因此,在为军用/航空应用设计无线电综合测试仪的过程中,必须仔细考虑产品的特殊工作条件,例如温度和湿度,和航空产品的可靠性一直是无线电综合测试仪设计工程师必须关注的主要问题。具有CT功能的X射线检查系统是离线完成的,因为需要许多2D图像和复杂的算法,因此需要花费几分钟的,因此,CT型X射线检查系统仅用于不太重要的专业研究分析应用程序。
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