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Q:检测时空白对照的吸光度变<0.3,仪器无法正常检测,应如何处理?A:出现空白对照的吸光度变<0.3的原因主要有以下两点:一是试剂保存条件不当,以致酶试剂活性下降,正确的保存条件为4-8℃冷藏保存(试剂为干粉状态时建议零下冷冻保存);二是检测环境的温度过低,农药残留检测的最适温度为38℃,若检测环境的温度低于15℃时,酶活性受到抑制,建议用户进行必要的保温措施(水浴、恒温箱等),以确保实验试剂的温度不会过低。
3.索氏提取法:大多数农药是脂溶性的,所以一般采取提取脂肪的方法,将经分散而干燥的样品用无水或石油醚等溶剂提取使样品中的脂肪和农残进入溶剂中,再净浓缩即可分析。适用谷物及其制品、干果、脱水蔬菜、茶叶、干饲料等样品。无水或石油醚等溶剂,提取效率高,操作简便。需要注意:提取时间长,消耗大量的溶剂必须考虑被测物的稳定性;含水量过高的水果蔬菜不宜作为分析对象。4.液-液萃取法:向液体混合物中加入某种适当溶剂,利用组分溶解度的差异使溶质由原溶液转移到萃取剂的过程。向溶液试样加入非极性或水溶性的溶剂,用振荡等方法来辅助提取试样中的溶质。适合液态样品,或经过其他方法溶剂提取后的液态基质。常用非极性的溶剂有正己烷、、乙乙酯;常用的水溶性溶剂有二烷、醇、乙、以及水。
在一定条件下,有机磷和氨基类农药对胆碱酯酶正常功能有抑制作用,其抑制率与农药的浓度呈正相关。正常情况下,酶催神经传导谢产物(乙酰胆碱)水解,其水解产物与显色剂反应,产生黄色物质,用分光光度计测定412nm下吸光度随时间的变值,计算出抑制率,通过抑制率可以判断出样品中是否含有有机磷或氨基酯类农药的残留。